ارائه کننده: طاهره ساوئی

استاد راهنما: دکتر رضا حسن ساجدی

استاد راهنمای دوم: دکتر اسماعیل حریریان

استاد مشاور: دکتر نوید پورزردشت

استاد مشاور دوم: دکتر ساره ارجمند

داور داخلی: دکتر صادق حسن نیا، دکتر فرنگیس عطایی

داور خارجی: دکتر سعید میردامادی،‌ دکتر شیرین شاهنگیان

نماینده تحصیلات تکمیلی: دکتر صادق حسن نیا

تاریخ : ۱۴۰۴/۰۳/۱۳ 

ساعت:‌ ۱۰ 

مکان : سالن دفاع دانشکده علوم پایه، طبقه منفی یک.

چکیده:

همه‌گیری جهانی COVID-19، نیاز مبرم به استراتژی‌های نوین واکسیناسیون، از جمله واکسن‌های خوراکی را برای بهبود دسترسی و تقویت ایمنی برجسته ساخته است. در این پژوهش، رویکردی نوین واکسن خوراکی با استفاده از نمایش سطحی مخمرPichia pastorisبرای بیان دُمین اتصال گیرنده (RBD) پروتئین اسپایک SARS-CoV-2 با استفاده از پروتئین حامل SED1 مورد بررسی قرار گرفته شد. سازه‌های طراحی‌شده شامل دُمین تریمرساز Foldon از فاژ T4 برای تسهیل تریمر شدن و بخش کوتاه شده فلاژلین (FliC) ازSalmonella typhimuriumبه عنوان یک ادجوانت برای افزایش ایمنی‌زایی بودند. سه سازه مخمری نوترکیب طراحی و ارزیابی شدند: سازه I (RBD-SED1)، سازه II (RBD-foldon-SED1) و سازه III (FliC-RBD-foldon-SED1). تمامیت ساختاری، چین‌خوردگی صحیح و تریمر شدن با استفاده از ColabFold مدل‌سازی و تأیید گردید. این سازه‌ها با موفقیت بر سطح مخمر بیان شده و از طریق روش‌هایی مانند SDS-PAGE، دات‌بلات، میکروسکوپ فلورسانس، فلوسایتومتری، ایمنواسی مبتنی بر مخمر کامل و ارزیابی اتصال مخمر نوترکیب به سلول‌های پستانداران دارای ACE2 تأیید شدند. تلقیح خوراکی مخمرهای نوترکیب به موش‌های BALB/c، به‌طور قابل توجهی آنتی‌بادی‌های اختصاصی IgG علیه دُمین RBD از پروتئین اسپایک را در سرم و IgA را در نمونه‌های مدفوع القا کرد که نشان‌دهنده پاسخ‌های ایمنی هومورال و مخاطی قوی بود. به‌طور خاص، سازه III بالاترین پاسخ ایمنی را ایجاد نمود. این یافته‌ها حاکی از آن است که واکسن‌های خوراکی مبتنی بر مخمر که RBD پروتئین اسپایک SARS-CoV-2 تریمر شده را همراه با یک قطعه پپتیدی از فلاژلین به عنوان ادجوانت تعدیل‌کننده ایمنی بیان می‌کنند، قادر به ایجاد ایمنی قوی هستند و جایگزین امیدوارکننده‌ای برای استراتژی‌های واکسیناسیون آتی COVID-19 ارائه می‌دهند.